色譜峰峰面積重現(xiàn)性差的常見原因及解決方法
在使用高效液相色譜系統(tǒng)進(jìn)行日常分析檢測的過程中，有時會遇到色譜峰峰面積重現(xiàn)性差的問題，導(dǎo)致無法對組分進(jìn)行準(zhǔn)確定量。
出峰面積重現(xiàn)性差的話，首先要看保留時間是否穩(wěn)定。如果保留時間都不穩(wěn)定，那也不用說出峰面積的穩(wěn)定了。而保留時間的穩(wěn)定性，跟 系統(tǒng)的壓力、流動相比例、流動相的脫氣以及 色譜柱都有關(guān)系。
導(dǎo)致色譜峰峰面積重現(xiàn)性差的常見原因及解決方法：
1、檢查進(jìn)樣量及進(jìn)樣操作
進(jìn)樣量不符合要求或者進(jìn)樣時操作失誤，都可能導(dǎo)致色譜峰面積重現(xiàn)性差。
如果是使用手動進(jìn)樣器且方法要求進(jìn)樣量小于定量環(huán)體積，必須使用合格的小體積進(jìn)樣針完成進(jìn)樣，且盡可能控制每次進(jìn)樣體積一樣。
如果是使用自動進(jìn)樣器，需檢查進(jìn)樣系統(tǒng)是否存在氣泡、樣品瓶是否裝得過滿、是否存在進(jìn)樣針座堵塞或漏液等。
2、查看峰型
如果峰型差，比如拖尾或者前沿、峰頂出現(xiàn)分叉等，將會影響工作站積分重復(fù)性。
3、核查樣品濃度
樣品尤其是揮發(fā)性樣品，可能由于放置時間過長而引起樣品濃度變化，導(dǎo)致峰面積重現(xiàn)性差。
4、核查樣品穩(wěn)定性
有的化合物可能室溫下不穩(wěn)定，再新配溶液進(jìn)樣試試看。
5、查看保留時間
保留時間不穩(wěn)定對峰面積重復(fù)性有很大的影響(一般保留時間越長峰面積會越小)，因此所有可能影響保留時間重現(xiàn)性的原因都有可能導(dǎo)致峰面積重現(xiàn)性差。在此之前我們已詳細(xì)分析過這些因素，主要包括：流動相流速不穩(wěn)定、流動相組成變化、色譜柱老化、柱溫變化等。
6、檢查流動相
樣品與流動相起始比例不兼容，有的樣品組分在梯度起始流動相里可能析出，請調(diào)整合適的流動相。
7、檢查色譜柱
色譜柱污染了，請使用更強的洗脫溶劑沖洗色譜柱。
8、核查檢測器參數(shù)
應(yīng)核查檢測器的各項參數(shù)：比如UV檢測器的溫度(若設(shè)置溫度)是否穩(wěn)定，CAD檢測器的載氣流速、氣體壓力是否正常等。
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