色譜柱受到污染該的應(yīng)對方法
色譜柱受到污染該的應(yīng)對方法
色譜柱在日常運用過程中，雖然維護嚴格，樣品和活動相雖然經(jīng)過前處理，但經(jīng)過長時間的運用，依然難以完全避免柱子受到污染，固定相丟失、板結(jié)、柱床陷落以及柱效下降等。有些能夠經(jīng)過維修，使部分柱效康復(fù)。
1.柱污染再生技術(shù)
色譜柱污染后，能夠用適宜的溶劑沖刷，使柱效再生。C18柱慣例的再生洗滌辦法是：分別用甲醇、三氯甲烷、甲醇/水各60 mL順次經(jīng)過色譜柱，再用100%甲醇60 mL平衡色譜柱后封存，柱效將康復(fù)正常。必要時，根據(jù)柱污染性質(zhì)(如有機污染、鹽類污染等)，選用0.05 mol/L H2SO4、0.5 mol/L H3PO4或0.1 mol/L EDTA鈉鹽沖刷，然后再用水沖刷，后用100%甲醇平衡色譜柱后封存。關(guān)于嚴峻污染的C18柱，可選用水、甲醇、氯仿、乙烷順次沖刷后，按順序倒過來再沖刷1次，每次所用溶劑60 mL，不接檢測器，后用100%甲醇平衡色譜柱封存。
2.柱污染的修正
在柱污染再生無效或已知柱污染嚴峻時，能夠選用柱修補的辦法解決，但柱污染深度不宜超過5 mm。辦法是將特制小鏟將污染部分挖去，再用與柱填料相同的固定相與活動相混合制成漿狀，然后將漿狀固定相細心補入被挖去的部分(盡量使后添補的固定相挨近原裝的緊密程度)，修平端面即可。修好的柱子如果柱頭兩頭的篩板的孔徑是共同的，可將柱子倒置過來運用一般時間，意圖是借助活動相沖刷作用，康復(fù)柱床緊密程度。
3.柱陷落的修正
柱陷落的原因很多。關(guān)于陷落不太嚴峻時，如果柱頭兩頭的篩板孔徑是共同的，可將柱倒置運用一般時間，即可康復(fù)性能。當陷落嚴峻(5 mm左右)時，可選用柱污染的修正辦法修補即可。
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