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賽默飛世爾三大氨基柱色譜柱的區(qū)別及維護

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時間:2020-04-21 10:14:09

無論氣相仍是液相,色譜柱都是別離的核心。液相色譜柱的固定相可以說是形形色色,有C18,C8,C4,苯基柱,氰基柱,氨基柱等等。色譜柱運用的好壞,直接關(guān)系到剖析別離的結(jié)果,咱們都知道氨基柱有運用壽命短等問題,今日在這里給咱們帶來氨基柱的運用保護攻略,希望通過更好的保護運用,讓咱們手中的色譜柱發(fā)揮出更大的效果。


說起氨基柱,咱們了解的是拿它來做糖的剖析。這是一個典型的HILIC形式。除了HILIC形式以外,氨基柱還可以用做正相和弱陰離子交流兩種形式。可以說應(yīng)用范圍和形式非常廣。


ThermoFisher色譜柱系列咱們族中擁有三款氨基鍵合相的色譜柱,分別是Hypersil GOLD Amino、Syncronis Amino和Hypersil APS-2。有人會問,都是氨基柱,他們的差異又在哪里呢?


讓小編來給咱們逐個做個介紹。Hypersil Gold Amino這款氨基柱具有更對稱的峰型,在生產(chǎn)工藝上有更致密的鍵合技能,硅膠表面殘存的硅醇基數(shù)量低。Syncronis Amino這款氨基柱金屬雜質(zhì)含量在同類色譜柱中低,可以帶來更高的柱效,而Hypersil APS-2這款氨基柱在別離多組分化合物時更具優(yōu)勢,并且在美國藥典和歐洲藥典中多有應(yīng)用。說了這么多咱們看看下面該怎么運用保護。


 

保存液

(Gold Amino和Syncronis Amino)出廠保存液為乙醇,APS-2柱出廠保存液為:異辛烷:乙醇:水=85:14.7:0.3,新色譜柱假如運用反相活動相條件,請充沛置換色譜柱內(nèi)正相溶劑。

活化

新色譜柱假如運用HILIC形式,運用前請運用異丙醇小流速過夜平衡色譜柱。流速主張0.1mL/min,之后再轉(zhuǎn)換到100%乙腈沖刷20柱體積,然后轉(zhuǎn)換到和活動相相同比例的不含鹽的乙腈水系統(tǒng)沖刷20柱體積。

沖刷

用乙腈:水=60:40條件對色譜柱進行清洗,清洗時,不主張水相比例超越40%,過高運用水相容易導(dǎo)致鍵合相水解。

色譜柱再生

當色譜柱通過長期運用,柱效很低時,可以對色譜柱再生處理,用乙腈:水(水中參加0.05%氨水)=60:40條件沖刷30柱體積。



保存

一個月以內(nèi)的保存,請運用與所選用活動相組成相同的有機溶劑和水的混合溶液(不含酸、無機鹽)進行置換,請避免只用水進行置換;一個月以上的長期保存,在進行了上述處理之后,請用乙腈置換并保存。


氨基柱糖類的分析

1、請設(shè)定乙腈/水的活動相條件。乙腈的濃度越高,則對糖的保存才能越強。

2、若選用含甲醇或緩沖鹽的活動相,峰會展寬。

3、若將糖的水溶液作為樣品注入,譜峰會展寬。請運用含乙腈50%以上的溶劑來制造糖類樣品。

4、曾在酸性條件下運用過的色譜柱,糖類剖析的保存時間、峰形會發(fā)生變化。


離子型物質(zhì)的分析

1、請設(shè)定乙腈/磷酸緩沖液且具有必定pH值的活動相條件。

2、調(diào)查活動相條件時,按照pH由高到低的次序進行調(diào)查。假如曾經(jīng)在低pH下運用,填料的表面將無法回到初始狀況。

3、有時需要長期平衡色譜柱(24小時以上)。平衡所需時間與通液量和鹽濃度嚴密相關(guān),因而,時間緊迫時請?zhí)岣吡魉伲騪H不變而增加活動相的鹽濃度來進行平衡。




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