高效液相色譜儀貯液器介紹及影響梯度洗脫的因素
高效液相色譜儀貯液器概述：
高效液相色譜儀貯液器是用來存放流動相的容器，供給符合要求的流動相以完成液相色譜分析工作。
一、貯液器材質(zhì)：
貯液器材質(zhì)應(yīng)耐腐蝕，對洗脫液呈化學(xué)惰性，可為玻璃、不銹鋼和聚四氟乙烯等材料。
二、貯液器容積：
貯液器容積與色譜柱的粗細(xì)、輸液泵的種類和所采用的液相色譜系統(tǒng)有關(guān)，一般容積約為0.5～2L，以便在不重復(fù)加液的情況下能連續(xù)工作。對凝膠色譜儀和制備液相色譜儀，其容積應(yīng)更大一些。
三、貯液器放置位置：
貯液器放置位置要高于輸液泵，以保持一定的輸液靜壓差。
四、貯液器的密閉：
使用過程中貯液器應(yīng)密閉，防止溶劑蒸發(fā)引起流動相組成的變化，防止空氣中O2和CO2重新溶解在已脫氣的流動相中。
五、溶劑的過濾：
高效液相色譜所用的溶劑在放入貯液器之前必須經(jīng)過0.45um的濾膜過濾，除去溶劑中可能含有的機械性雜質(zhì)，防止輸液管道或進(jìn)樣閥產(chǎn)生阻塞。對輸出流動相的連接管路，其插入貯液器的一端通常要連有孔徑為0.45um的多孔不銹鋼過濾器或由玻璃制成的專用膜過濾器。
影響高效液相色譜儀梯度洗脫的因素：
高效液相色譜儀進(jìn)行梯度洗脫時，選定溶劑A、B之后，設(shè)定梯度速度和梯度時間，確定梯度曲線形狀，要以zui經(jīng)濟的梯度洗脫程序，實現(xiàn)樣品的zui佳化分離。影響梯度洗脫的因素有：
1、溶劑的純度要高，否則會使梯度洗脫的重現(xiàn)性變壞。
2、梯度混合的溶劑互溶性要好，應(yīng)防止不互溶的溶劑進(jìn)入色譜柱。
3、注意溶劑的粘度和密度對混合流動相組成的影響。
4、梯度洗脫應(yīng)使用對流動相組成變化不敏感的選擇型檢測器，而不能使用對流動相組成變化敏感的通用型檢測器。
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