什么情況不用C18，C8反相液相色譜柱使用注意事項(xiàng)
C18柱C18色譜柱是目前最常用、每個(gè)實(shí)驗(yàn)室必備的通用型色譜柱。填料是硅膠基質(zhì)上鍵合十八烷基，有較高的碳含量和較好的疏水性，適用于大多數(shù)化合物，包括非極性、極性小分子及一些多肽及蛋白質(zhì)。
C8反相液相色譜柱具有無與倫比的性能。即使對(duì)于非常難分離的堿性化合物，也可獲得出色的峰形，從而改善了這些類型的樣品的柱效和分離度。由于安捷倫在硅膠制造和鍵合技術(shù)方面進(jìn)行了改進(jìn)，因此能夠獲得這樣優(yōu)異的性能，并且這些技術(shù)完全由安捷倫控制。
C8反相液相色譜柱使用中的注意事項(xiàng)
1、新C18柱在使用前，須先用甲醇或乙腈試劑以20倍柱體積低流速?zèng)_洗，作用是使固定相能充分潤濕、碳鏈?zhǔn)嬲箯氐祝笴8反相液相色譜柱的性能達(dá)到更好狀態(tài)。具體操作是，將配制好65%的乙腈/水沖洗后，把色譜柱進(jìn)口端連接在色譜儀上，出口端放空（不可連上檢測(cè)器，以免污染了檢測(cè)器），以0.1ml/min~0.5ml/min的低流速將色譜柱中的清稀溶液吹干，過20分鐘后再接上檢測(cè)器，以1.0ml/min的流速，繼續(xù)沖洗2~8小時(shí)；
2、液相色譜儀檢測(cè)分析樣品完畢后，須沖洗色譜柱。尤其是流動(dòng)相中含有酸或鹽時(shí)，需將色譜柱中的酸或鹽沖洗干凈，通常建議用10%甲醇水沖洗20倍柱體積；
3、若C8反相液相色譜柱處于長期閑置狀態(tài)時(shí)，要將色譜柱徹底沖洗，建議沖洗3-4小時(shí)以上，保存在純有機(jī)試劑或高比例的有機(jī)試劑溶液中；
4、由于C18柱的固定相疏水性較強(qiáng)，在使用過程中盡量不要使用高水相條件，若水相比例過高易引起固定相疏水塌陷，引起柱效迅速下降，甚至造成不可逆的負(fù)面影響；由于碳載量高，表現(xiàn)尤為明顯，建議使用過程中水相比例不超過90%；
5、壓力升高、柱性能下降：通常為色譜柱被污染，對(duì)色譜柱進(jìn)行再生處理可恢復(fù)部分柱效；
6、壓力驟升：通常由鹽析出或篩板堵塞引起，若是鹽析出，用10%甲醇水低流速?zèng)_洗至壓力恢復(fù)即可；若判斷并非鹽析出，以純甲醇或10%甲醇水為流動(dòng)相反沖色譜柱（將色譜柱反接，不接檢測(cè)器），若反沖半小時(shí)仍無效果則說明反沖無效，需尋找其他原因。
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