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C18色譜柱和C8的區(qū)別及C18色譜柱壽命、維護(hù)、被污染怎么辦

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時間:2018-09-12 14:53:38

C8柱是修飾的帶8個碳原子的硅烷,而C18是修飾的18個碳原子的硅烷。通常,我們檢測樣品首先選用C18柱;如果樣品的分子量較大,就選C8;如果分子量再大,就選C4。(不過也不是絕對,個人認(rèn)為選擇適當(dāng)?shù)牧鲃酉喔匾?/span>

C18色譜柱

問:正常一個C18色譜柱使用壽命?

答:柱壽命一般不按時間計(jì)算,按持續(xù)進(jìn)樣針數(shù)比較科學(xué)。一般正常使用維護(hù),不超過pH和溫度等范圍,C18柱能達(dá)到500-2000針進(jìn)樣的壽命,視樣品干凈程度的不同而不同。


問:一根常用的c18色譜柱,拿到一根新柱的時候應(yīng)該怎樣進(jìn)行活化及維護(hù)?為什么要這樣做?

答:新柱活化,實(shí)際上是一個平衡的過程,除了用流動相平衡外,有時候還必須用所測樣品對新柱進(jìn)行平衡,特別是測定分子量比較高的多肽,尤其重要。因?yàn)榉肿恿扛叩奈镔|(zhì)分子,擴(kuò)散速度慢,平衡所需時間也相應(yīng)較長。具體平衡方式也很簡單,多進(jìn)幾次樣品,直到峰面積和保留時間穩(wěn)定,再進(jìn)行正式進(jìn)樣測定。

如果要加快平衡時間,把前面用來平衡的進(jìn)樣樣品濃度加大,或者不等洗脫完成,連續(xù)進(jìn)樣多針。用待測物對新柱平衡,目的是將硅膠基質(zhì)填料表面具有非特異性吸附的位點(diǎn)的吸附能力飽和掉。


問:做農(nóng)藥殘留分析的,不同的基質(zhì)雜質(zhì)含量是不同的,我用C18分析時有可能一次就污染了,我用高流速,和反向沖洗都解決不了,是不是這根柱子就廢了,有沒有其他的辦法?

答:高流速反向沖洗是對的,關(guān)鍵你用了什么溶劑沖洗呢?用原來的流動相沖洗肯定不管用,要不然就不會累積在柱子上了。你應(yīng)該用流動相中的強(qiáng)溶劑B沖洗,如果不行,就需要啟用再生的程序,當(dāng)然再生時用的溶劑更強(qiáng)。



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