五年就壞?使用液相色譜柱的四個(gè)避免和三個(gè)禁止
之前有人咨詢我,為什么我買的安捷倫液相色譜使用一兩年后就毛病多多,第五年就要返廠大修了,維修的費(fèi)用都抵得上原機(jī)費(fèi)用的四分一了。查看了儀器的使用記錄后發(fā)現(xiàn)了倪端,原因是一直以來(lái)沒(méi)有按照規(guī)程操作使用。
正確使用和維護(hù)液相色譜色譜柱尤為重要,使用不當(dāng)就會(huì)降低柱效、縮短使用壽命甚至損壞,別人用15年,你的可能只能用五六年。以下從幾個(gè)方面簡(jiǎn)答介紹液相色譜柱在使用過(guò)程中應(yīng)當(dāng)著重注意的問(wèn)題。
一、避免壓力和溫度的急劇變化
溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會(huì)影響柱內(nèi)的填充狀況;柱壓的突然升高或降低也會(huì)沖動(dòng)柱內(nèi)填料,因此在調(diào)節(jié)流速時(shí)應(yīng)該緩慢進(jìn)行,以保持色譜柱內(nèi)填料的穩(wěn)定性。
二、避免直接改變?nèi)軇┑慕M成
在需要改變檢測(cè)樣品溶液組成是,應(yīng)逐漸改變?nèi)軇┑慕M成,特別是反相色譜中,不應(yīng)直接從有機(jī)溶劑改變?yōu)槿渴撬?,反之亦然。且在使用次洗脫能力?qiáng)的 洗脫液沖洗色譜柱時(shí),對(duì)流路系統(tǒng)中流動(dòng)相的置換應(yīng)以相混溶的溶劑逐漸過(guò)渡,每種流動(dòng)相的體積應(yīng)是柱體積的20倍左右,即常規(guī)分析需要50~75ml。
三、避免色譜柱反沖
一般來(lái)說(shuō)色譜柱不能反沖,只有色譜柱使用說(shuō)明書上標(biāo)明該柱可反沖才可以反沖除去留在柱頭上的雜質(zhì)。否則,反沖色譜柱的影響是迅速降低柱效。
四、避免流動(dòng)相使用不當(dāng)而破壞固定相
選擇使用適宜的流動(dòng)相(尤其是pH),以避免固定相被破壞。有時(shí)可以在進(jìn)樣器前面連接一段預(yù)柱,分析柱是鍵合硅膠時(shí),預(yù)柱為硅膠,可使流動(dòng)相在進(jìn)入分析柱之前預(yù)先被硅膠"飽和",避免分析柱中的硅膠基質(zhì)被溶解。
五、禁止樣品未經(jīng)處理直接進(jìn)入色譜柱
避免將基質(zhì)復(fù)雜的樣品尤其是生物樣品直接注入柱內(nèi),需要對(duì)樣品進(jìn)行預(yù)處理或者在進(jìn)樣器和色譜柱之間連接一保護(hù)柱。保護(hù)柱一般是填有相似固定相的短柱。保護(hù)柱可以而且應(yīng)該經(jīng)常更換。
六、禁止將緩沖溶液長(zhǎng)時(shí)間存放在色譜柱內(nèi)
保存色譜柱時(shí)應(yīng)將柱內(nèi)充滿乙腈或甲醇,柱接頭要擰緊,防止溶劑揮發(fā)干燥。禁止將緩沖溶液留在柱內(nèi)靜置過(guò)夜或更長(zhǎng)時(shí)間。
七、禁止色譜柱未經(jīng)處理直接封存
色譜柱使用完成之后須使用相宜溶劑進(jìn)行清潔處理,例如ODS柱宜用甲醇沖洗至基線平衡;當(dāng)采用鹽緩沖溶液作流動(dòng)相時(shí),使用完后應(yīng)用無(wú)鹽流動(dòng)相沖洗;含鹵族 元素(氟、氯、溴)的化合物可能會(huì)腐蝕不銹鋼管道,不宜長(zhǎng)期與之接觸;裝在液相色譜儀上的色譜柱如不經(jīng)常使用,應(yīng)每隔4-5天開(kāi)機(jī)沖洗15分鐘。
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