液相色譜儀沖洗是正常工作的保障
運用液相色譜儀HPLC體系杰出運行的第三個關(guān)鍵是堅持體系的清潔。你需求重視活動相流經(jīng)該體系的一切當(dāng)?shù)?，關(guān)于這些當(dāng)?shù)亟?jīng)常性的沖刷，將使你的體系堅持在“Ready”狀態(tài)。
1、活動相儲液瓶
首先要經(jīng)常清洗活動相儲液瓶，或者每做一批新樣品替換一次活動相。一個臟的儲液瓶將會污染注入的活動相。主張儲液瓶中緩沖液運用時刻不要超過一周，而有機(jī)溶劑運用時刻不要超過一個月。也有人主張儲液瓶中堅持用溶劑充溢，直到替換剖析方法儲液瓶需替換新溶劑（活動相組成發(fā)生變化）時，將舊溶劑倒掉替換新溶劑，這樣勝于將溶劑用完。但這關(guān)于剖析樣品量少的實驗室而言似乎有些糟蹋。儀器公司的工程師主張儲水瓶的水要天天換，每周瓶子還應(yīng)該用異丙醇清洗一次。有的實驗室則在水里加入0.1～1 mM的甲酸抑制微生物的成長。這些做法看起來有些繁瑣，但卻能起到“磨刀不誤砍柴工”作用。
2、泵
接下來要沖刷的是泵。千萬不要一剖析完沖幾分鐘后就停泵，特別是當(dāng)活動相中含有難蒸發(fā)的緩沖液（如磷酸鹽）時。假如儀器不是連續(xù)運用，當(dāng)活動相蒸發(fā)時，難蒸發(fā)物就會粘在活塞密封墊的外表，難蒸發(fā)物將構(gòu)成固形物堆積。這是泵密封墊磨損和單向閥滲漏的主要原因之一。所以，無論運用長短，在停泵以前一定要用非緩沖液活動相沖刷泵在半個小時以上，要是活動相中有難蒸發(fā)緩沖鹽則主張沖刷的時刻應(yīng)該更長些。
3、自動進(jìn)樣器
自動進(jìn)樣器也要按規(guī)則清洗?，F(xiàn)在的儀器多配有自動進(jìn)樣器的沖刷液瓶，一般只需注意及時替換、彌補沖刷液即可。自動進(jìn)樣器用的洗滌液也要采用與活動相相同的方式處理，并根據(jù)溶劑的有用期和規(guī)則，清洗儲液瓶或替換洗滌液?，F(xiàn)在的自動進(jìn)樣器設(shè)置、操作都很簡單，假如時刻允許（特別是利用夜間運行），每次剖析完后設(shè)置進(jìn)1、2針純?nèi)軇ㄈ缂状肌⒁译妫?，也是一個好做法。
4、色譜柱
對色譜柱的污染是隨運用時刻而增加。一般表現(xiàn)是：運行走基線時在記載的色譜圖中基線噪音增加，泵壓也增加。解決這個問題的zui有用方法就是在每一批樣品剖析完畢后或預(yù)備卸下柱子時用大量的活動相沖刷柱子（例如，甲醇、乙腈和水）。用梯度沖刷作用更好，具體的份額要根據(jù)柱子的說明書和性質(zhì)而定。
5、檢測器
假如是正常運用，檢測器將根據(jù)其性質(zhì)并按照說明書規(guī)則進(jìn)行洗。例如UV/VIS檢測器或FL檢測器，在對柱子和體系進(jìn)行沖刷時也就一同對檢測器流通池中污染物進(jìn)行了清洗?？墒钦舭l(fā)光檢測器或質(zhì)譜儀則需求按照說明書進(jìn)行定時清洗。這些檢測器在運用時會有難蒸發(fā)污染物堆積，如質(zhì)譜儀離子源的噴針、毛細(xì)管、錐孔板、預(yù)四極等部件，因此需求定時清洗。并且對聯(lián)有這些檢測器的體系沖刷時，zui好與這些檢測器斷開，以減少對檢測器的污染。
總歸，實驗室日常運用的液相色譜儀要是能認(rèn)真做好這三項工作——脫氣、過濾和沖刷，你的儀器可以得到杰出的預(yù)防性維護(hù)，運用時就會感到比較順手。當(dāng)然，在實際操作時遇到的問題并沒有這么簡單，但這三個杰出習(xí)慣將是正確操作、運用HPLC體系的基礎(chǔ)。
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