怎么判斷色譜柱何時該換新柱了

標題：怎么判斷色譜柱何時該換新柱了？

色譜工作者常會碰到這樣的問題，什么時分該換色譜柱了? 色譜柱的塔板數(shù)能表現(xiàn)色譜柱的狀況嗎?確認標明一支色譜柱應(yīng)該“退休”的規(guī)范，從經(jīng)驗來看，當一支色譜柱的塔板數(shù)降低到新柱子時的百分之多少時就能夠以為該色譜柱不能再運用了呢?在您的實驗室里是怎么判斷一根色譜柱不能夠再用了呢?

相信每個色譜工作者都會關(guān)心分辨率，分辨率是調(diào)查一根色譜柱別離詳細樣品的好壞程度的目標。色譜的中心任務(wù)便是為了使每個峰完結(jié)別離，咱們在實際工作中需要得到合理峰寬的窄峰以便獲得較低的檢測限(這現(xiàn)已不是什么難題，現(xiàn)在的色譜柱都能夠達到這個要求)?！?/span>

較好的辦法是運用壓力、分辨率和峰形的混合目標來調(diào)查一根色譜柱的狀況。壓力的丈量是zui簡單的，一般咱們確認的色譜辦法要滿足以下的要求：用新柱子時柱壓不高于2500psi，在任何狀況下壓力都不超越3000psi。雖然現(xiàn)代的液相色譜體系都可在更高的壓力下運用，但因為高壓產(chǎn)生的體系損耗和泄漏的問題會很嚴峻。當壓力超越3000psi時，考慮替換進樣器和色譜柱之間的0.5mm孔徑的在線濾片。假如替換濾片后壓力依然高，則色譜柱的濾片或者是色譜柱現(xiàn)已被污染，這提示咱們該換柱子了。有計算標明，超越60%的色譜柱損壞是因為壓力過高的原因。

分辨率是咱們調(diào)查色譜柱的一個非常重要的目標，只需兩個組分能夠獲得基線別離，對該剖析物的定量就不會有什么問題。對于對稱的高斯峰來講，1.5的分辨率即可得到基線別離;若Rs在1.7至2.0之間則更好。若峰拖尾嚴峻則需要更高的分辨率。運用分辨率作為色譜柱的評價目標的優(yōu)點在于咱們能夠直觀地看到相鄰的峰的別離狀況。

別的一個調(diào)查色譜柱質(zhì)量的規(guī)范是峰形拖尾狀況，廠家測試報告的峰形都非常美麗，但這并不代表該色譜柱剖析實際樣品的狀況。實際樣品中總是含有或多或少引起峰形拖尾的組分。zui值得一提的是含有氮原子的化合物，這些化合物和硅膠骨架上的游離硅羥基結(jié)合非常嚴密，隨著色譜柱運用時刻越長，鍵合相丟失，拖尾則更加嚴峻。然而拖尾狀況的改動不像分辨率的改動那樣能夠馬上看出來。基于此，zui好定一個拖尾因子的上限，如美國藥典規(guī)則拖尾因子不超越1.8。

確認色譜柱“拋棄”規(guī)范的zui佳時刻是當咱們開發(fā)剖析辦法或作辦法認證的時分。一般，在開發(fā)剖析辦法的過程中你會實驗幾根色譜柱，剖析足夠多的實際樣品，你知道當別離變差的時分是什么樣的狀況。我傾向于在開始時運用一個寬的范圍。咱們的經(jīng)驗是這樣的：你假如在開始時緊縮體系適用性要求，在辦法認證后再放寬這個要求是很困難的。在剖析實際樣品之前進行體系適用性調(diào)查，以保證該色譜辦法滿足剖析者能夠承受的規(guī)范。

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