【行業(yè)新聞】新冠病毒是這樣被P3實(shí)驗(yàn)室檢測出來的
在廣東省第二人民醫(yī)院P3實(shí)驗(yàn)室標(biāo)本處理間內(nèi)，研討人員正進(jìn)行開蓋加樣和核酸提取。
核酸檢測是確診新冠肺炎的“金標(biāo)準(zhǔn)”，而檢測流程中的每一個(gè)環(huán)節(jié)都是精細(xì)活，容不得半點(diǎn)粗心。
“這兒是與病毒‘零距離’接觸的當(dāng)?shù)?，整個(gè)實(shí)驗(yàn)室完全密封，室內(nèi)處于負(fù)壓狀況，我們喜愛用‘三流’來描述它，即人流、物流、氣流的單向活動(dòng)，確保在里面的污染物不會(huì)泄露到外面而造成污染?！睆V東省第二人民醫(yī)院P3實(shí)驗(yàn)室主任林劍國說。而他說的“這兒”指的就是P3實(shí)驗(yàn)室（生物安全防護(hù)三級(jí)實(shí)驗(yàn)室）。廣東省第二人民醫(yī)院每天400多份新冠病毒核酸檢測就是在這兒展開的。
現(xiàn)在，讓我們揭開廣東省第二人民醫(yī)院P3實(shí)驗(yàn)室的奧秘面紗，看看在這兒病毒究竟是怎樣被“揪出來”的？
檢測流程每個(gè)環(huán)節(jié)都是精細(xì)活
核酸檢測是確診新冠肺炎的“金標(biāo)準(zhǔn)”，而檢測流程中的每一個(gè)環(huán)節(jié)都是精細(xì)活，容不得半點(diǎn)粗心。
實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的檢測流程可分為5個(gè)過程：樣本進(jìn)入“傳遞窗”—滅活處理—開蓋加樣和核酸提取—擴(kuò)增反應(yīng)判別效果—高壓滅菌。
第一步，搜集的檢測樣本如咽拭子或肛拭子，在進(jìn)入P3實(shí)驗(yàn)室前就得先進(jìn)入一個(gè)特別的窗口——“傳遞窗”，這個(gè)窗口也叫Air Lock，空氣鎖，望文生義，與空氣有關(guān)。這個(gè)傳遞窗有不能一同翻開的兩層門，確保傳遞樣本時(shí)帶進(jìn)去的空氣被阻隔在兩層門中，確保實(shí)驗(yàn)室外的環(huán)境不受污染。這也是“三流”中“物流”，樣本從這兒敞開了其在實(shí)驗(yàn)室中短暫的終身。
第二步，樣本在水浴箱經(jīng)半個(gè)小時(shí)56℃的高溫滅活，使病毒蛋白不再有生理活性，失掉感染、致病和繁殖能力，使實(shí)驗(yàn)員在對(duì)樣本進(jìn)行檢測時(shí)相對(duì)安全，但是病毒蛋白的基因序列并沒有受到影響。
第三步，進(jìn)行開蓋加樣和核酸提取。
第四步，提取的核酸送到核酸檢測室內(nèi)，就要上儀器了。提取的核酸參加擴(kuò)增試劑中，經(jīng)過熒光PCR儀進(jìn)行RT-PCR反應(yīng)，先將提取的核酸回轉(zhuǎn)錄成DNA，再以DNA為模版，對(duì)特定位點(diǎn)進(jìn)行擴(kuò)增，使用不同的溫度進(jìn)行變性、退火和延伸，每個(gè)循環(huán)搜集熒光值，45個(gè)循環(huán)后制作熒光曲線，用時(shí)約110分鐘，實(shí)驗(yàn)員根據(jù)熒光曲線剖析判別效果的陰性和陽性。
第五步，實(shí)驗(yàn)進(jìn)程發(fā)生的污物經(jīng)過高壓滅菌后，按相關(guān)普通醫(yī)療垃圾處理?！拔锪鳌痹谶@兒就完畢了。
檢測效果履歷重重比對(duì)與復(fù)核
任何一個(gè)環(huán)節(jié)呈現(xiàn)問題都或許導(dǎo)致檢測效果過失。因而，為確保檢測的質(zhì)量，檢測效果將履歷重重的比對(duì)與復(fù)核。
據(jù)介紹，檢測質(zhì)量的確保辦法在檢測前就現(xiàn)已開始了，樣本搜集的醫(yī)務(wù)人員有必要經(jīng)過嚴(yán)峻的練習(xí)和考核才華上崗，樣本的質(zhì)量與搜集的技術(shù)密切相關(guān)，每個(gè)動(dòng)作流程都有必要按規(guī)定進(jìn)行，樣本搜集完成后的護(hù)送作業(yè)也需依照緊密的程序，由專人專道配送到實(shí)驗(yàn)室。
在檢測進(jìn)程中，實(shí)驗(yàn)員始終保持慎重的情緒進(jìn)行每一次檢驗(yàn)，不失去任何一個(gè)可疑樣本，針對(duì)可疑樣本，還會(huì)選用不同的試劑進(jìn)行復(fù)核確認(rèn)；其次，依照流程，每進(jìn)行一批實(shí)驗(yàn)，均會(huì)隨機(jī)刺進(jìn)三個(gè)以上空白對(duì)照，針對(duì)陽性樣本還會(huì)進(jìn)行病毒基因的測序比對(duì)，以避免“假陽性”的呈現(xiàn)。
檢測后，實(shí)驗(yàn)室還會(huì)定時(shí)隨機(jī)抽取檢測樣本送到第三方實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢測，對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行比照剖析，一同實(shí)驗(yàn)室也會(huì)參加衛(wèi)生主管部門和廣東省臨床中心的室間質(zhì)評(píng)，確保檢測的準(zhǔn)確性。
病毒“偵察兵”業(yè)務(wù)過硬又勇敢
在操作中，實(shí)驗(yàn)員面臨眼前的樣本，需求“一個(gè)一個(gè)地揭開蓋子，進(jìn)行開蓋加樣和核酸提取”，這無疑是與病毒的正面交鋒。核酸檢測的主旨是高效、有序和安全。其中安全是重中之重，尤其是實(shí)驗(yàn)員的安全。
因而實(shí)驗(yàn)員要進(jìn)入P3實(shí)驗(yàn)室，首要應(yīng)在清潔區(qū)內(nèi)穿戴中級(jí)防護(hù)服，經(jīng)過緩沖間進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室負(fù)壓作業(yè)間，在這兒進(jìn)行標(biāo)本處理，核酸提取及檢測，完畢后進(jìn)行空間、外表消毒，再按次序脫下防護(hù)服，經(jīng)過淋浴間更衣后，回到清潔區(qū)。這些過程有必要嚴(yán)峻履行，一個(gè)都不能少。
廣東省第二人民醫(yī)院P3實(shí)驗(yàn)室檢測團(tuán)隊(duì)現(xiàn)在有21人，施行一天三班制。在疫情爆發(fā)階段，為了滿意檢測需求，縮短檢測時(shí)間，實(shí)驗(yàn)室又在原有團(tuán)隊(duì)基礎(chǔ)上，從風(fēng)濕免疫科、血液科等科室的實(shí)驗(yàn)室調(diào)配了人員。這些病毒“偵察兵”70%以上是碩士以上學(xué)歷，均經(jīng)過分子生物學(xué)的練習(xí)，并具有多聚酶鏈反應(yīng)（PCR）上崗證。
實(shí)驗(yàn)室嚴(yán)峻遵循“新式冠狀病毒肺炎醫(yī)治方案”及生物安全要求，檢測人員需在P3實(shí)驗(yàn)室負(fù)壓密閉的空間里穿戴三級(jí)防護(hù)配備，5個(gè)小時(shí)不吃不喝，甚至穿戴成人紙尿褲以處理上廁所的問題，隨時(shí)需求面臨因負(fù)壓差及配備緊密導(dǎo)致的頭暈、吐逆等癥狀。
“與戰(zhàn)爭在病房里的醫(yī)護(hù)人員不同，他們藏在實(shí)驗(yàn)室里，每天與病毒近距離接觸，是人們看不見的‘最前哨’?！绷謩f。
相關(guān)鏈接
生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室分幾級(jí)
生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室是指實(shí)驗(yàn)室的結(jié)構(gòu)和設(shè)施、安全操作規(guī)程、安全設(shè)備可以確保作業(yè)人員在處理含有致病微生物及其毒素時(shí)，不受實(shí)驗(yàn)?zāi)繕?biāo)侵染，并確保周圍環(huán)境不受污染。
根據(jù)所處理微生物及其毒素的危害程度不同，生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室分為四級(jí)，一級(jí)最低，四級(jí)最高。生物安全防護(hù)一級(jí)實(shí)驗(yàn)室一般適用于對(duì)健康成年人無致病效果的微生物；二級(jí)適用于對(duì)人和環(huán)境有中等潛在危害的微生物；三級(jí)適用于首要經(jīng)過呼吸途徑使人傳染上嚴(yán)峻的甚至是致死疾病的致病微生物或其毒素；四級(jí)適用于對(duì)人體具有高度的風(fēng)險(xiǎn)性，經(jīng)過氣溶膠途徑傳達(dá)或傳達(dá)途徑不明、尚無有效疫苗或醫(yī)治辦法的致病微生物或其毒素。
20世紀(jì)80時(shí)代，為了研討流行性出血熱病毒的傳達(dá)機(jī)制，我國修建了第一個(gè)P3實(shí)驗(yàn)室。2003年爆發(fā)的SARS疫情，是我國高等級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室展開的一個(gè)分水嶺。SARS爆發(fā)后，我國發(fā)布了國家生物安全實(shí)驗(yàn)室制作系統(tǒng)規(guī)劃。一批P3實(shí)驗(yàn)室投入工作，并建成了P4實(shí)驗(yàn)室。
2015年1月31日，我國首個(gè)P4實(shí)驗(yàn)室、中科院武漢國家生物安全實(shí)驗(yàn)室在武漢竣工。2018年1月4日，實(shí)驗(yàn)室經(jīng)過國家衛(wèi)計(jì)委（現(xiàn)國家衛(wèi)健委）高致病性病原微生物實(shí)驗(yàn)活動(dòng)現(xiàn)場評(píng)估，成為我國甚至亞洲首個(gè)正式投入工作的P4實(shí)驗(yàn)室。
其時(shí)，全球的P4實(shí)驗(yàn)室制作正呈現(xiàn)超速展開的趨勢(shì)。這與全球化時(shí)代的烈性流行癥風(fēng)險(xiǎn)有關(guān)，也與國家生物安全戰(zhàn)略有關(guān)。據(jù)不完全統(tǒng)計(jì)，全球已知有22個(gè)國家和地區(qū)的60個(gè)組織具有P4實(shí)驗(yàn)室。但由于P4實(shí)驗(yàn)室相關(guān)內(nèi)容觸及國家生物安全中心機(jī)密，所以一些國家并未揭穿數(shù)據(jù)。
經(jīng)過這些年的展開，現(xiàn)在我國已有幾十家P3、P4實(shí)驗(yàn)室，為我國烈性與嚴(yán)重流行癥防控、生物防備和產(chǎn)業(yè)展開作出了重要貢獻(xiàn)。
來源：科技日?qǐng)?bào)
上一篇:【行業(yè)新聞】驗(yàn)室的小白鼠 科學(xué)家研究降低實(shí)驗(yàn)動(dòng)物痛苦
